Wat is de beste methode?
—Tests voor SARS-CoV-2-infectiediagnose
Voor bevestigde gevallen van COVID-19 zijn de meest voorkomende klinische symptomen koorts, hoesten, spierpijn of vermoeidheid.Toch zijn deze symptomen geen unieke kenmerken van COVID-19, omdat deze symptomen vergelijkbaar zijn met die van andere met virus geïnfecteerde ziekten zoals griep.Op dit moment zijn virusnucleïnezuur Real-Time PCR (rt-PCR), CT-beeldvorming en sommige hematologische parameters de belangrijkste instrumenten voor de klinische diagnose van de infectie.Veel laboratoriumtestkits zijn ontwikkeld en gebruikt bij het testen van patiëntspecimens op COVID-19 door de Chinese CDC1, Amerikaanse CDC2en andere particuliere bedrijven.IgG/IgM-antilichaamtest, een serologische testmethode, is ook toegevoegd als diagnostisch criterium in China's bijgewerkte versie van de diagnose- en behandelingsrichtlijnen voor de nieuwe coronavirusziekte (COVID-19), die op 3 maart werd uitgegeven1.De virus-nucleïnezuur rt-PCR-test is nog steeds de huidige standaard diagnostische methode voor de diagnose van COVID-19.
StrongStep®Nieuwe Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex real-time PCR-kit (detectie voor drie genen)
Toch hebben deze real-time PCR-testkits, die zoeken naar genetisch materiaal van het virus, bijvoorbeeld in neus-, orale of anale uitstrijkjes, veel beperkingen:
1) Deze tests hebben lange doorlooptijden en zijn gecompliceerd in gebruik;het duurt over het algemeen gemiddeld meer dan 2 tot 3 uur om resultaten te genereren.
2) De PCR-tests vereisen gecertificeerde laboratoria, dure apparatuur en getrainde technici om te werken.
3) Er zijn enkele fout-negatieven voor rt-PCR van COVID-19.Het kan te wijten zijn aan een lage SARS-CoV-2-virale lading in het monster van de bovenste luchtwegen (nieuw coronavirus infecteert voornamelijk de onderste luchtwegen, zoals longblaasjes) en de test kan geen mensen identificeren die een infectie hebben doorgemaakt, hersteld en het virus uit hun lichaam hebben verwijderd.
Onderzoek door Lirong Zou et al4ontdekte dat hogere virale lasten werden gedetecteerd kort na het begin van de symptomen, met hogere virale lasten die werden gedetecteerd in de neus dan in de keel en het patroon van virale nucleïnezuurafgifte van patiënten geïnfecteerd met SARS-CoV-2 lijkt op dat van patiënten met griep4en lijkt anders dan die gezien bij patiënten die zijn geïnfecteerd met SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5onderzocht seriële monsters (keeluitstrijkjes, sputum, urine en ontlasting) van twee patiënten in Peking en ontdekte dat de virale lading in keeluitstrijkjes en sputummonsters een piek bereikte rond 5-6 dagen na het begin van de symptomen, sputummonsters vertoonden over het algemeen hogere virale ladingen dan monsters van keeluitstrijkjes.Er werd geen viraal RNA gedetecteerd in urine- of ontlastingsmonsters van deze twee patiënten.
PCR-test geeft pas een positief resultaat als het virus nog aanwezig is.De tests kunnen geen mensen identificeren die een infectie hebben doorgemaakt, herstelden en het virus uit hun lichaam hebben verwijderd.In feite was slechts ongeveer 30% -50% positief voor PCR bij patiënten met klinisch gediagnosticeerde nieuwe coronaviruspneumonie.Veel patiënten met nieuwe coronavirus-pneumonie kunnen niet worden gediagnosticeerd vanwege een negatieve nucleïnezuurtest, dus ze kunnen de bijbehorende behandeling niet op tijd krijgen.Van de eerste tot de zesde editie van de richtlijnen, uitsluitend gebaseerd op de diagnose van de resultaten van nucleïnezuurtests, die grote problemen veroorzaakten voor clinici. De vroegste "klokkenluider", Dr. Li Wenliang, een oogarts bij Wuhan Central Ziekenhuis, is dood.Tijdens zijn leven heeft hij drie nucleïnezuurtesten ondergaan in het geval van koorts en hoesten, en de laatste keer dat hij PCR-positieve resultaten kreeg.
Na discussie door experts werd besloten om serumtestmethoden als nieuw diagnostisch criterium te verhogen.Terwijl antilichaamtesten, ook wel serologische tests genoemd, kunnen bevestigen of iemand besmet is, zelfs nadat hun immuunsysteem het virus dat COVID-19 veroorzaakt, heeft verwijderd.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM antilichaam snelle test
Een IgG/IgM-antilichaamtest zal helpen om op een veel meer populatiegebaseerde manier te traceren wie de infectie heeft gehad, omdat veel gevallen lijken te worden verspreid door asymptomatische patiënten die niet gemakkelijk kunnen worden geïdentificeerd.Een echtpaar in Singapore, de man testte positief met PCR, het resultaat van de PCR-test van zijn vrouw was negatief, maar de resultaten van de antilichaamtest toonden aan dat ze antilichamen had, net als haar man.
Serologische testen moeten zorgvuldig worden gevalideerd om er zeker van te zijn dat ze betrouwbaar reageren, maar alleen op antilichamen tegen het nieuwe virus.Een punt van zorg was dat de gelijkenis tussen de virussen die het ernstige acute respiratoire syndroom veroorzaken en COVID-19 tot kruisreactiviteit zou kunnen leiden.De IgG-IgM ontwikkeld door Xue Feng wang6werd geacht te kunnen worden gebruikt als een point-of-care-test (POCT), omdat deze met bloed uit een vingerprik kan worden uitgevoerd naast het bed.De kit heeft een gevoeligheid van 88,66% en een specificiteit van 90,63%.Er waren echter nog steeds vals-positieve en vals-negatieve resultaten.
In China's bijgewerkte versie van de diagnose- en behandelingsrichtlijn voor de nieuwe coronavirusziekte (COVID-19)1, worden bevestigde gevallen gedefinieerd als vermoedelijke gevallen die aan een van de volgende criteria voldoen:
(1) Luchtwegmonsters, bloed- of ontlastingsmonsters positief getest op SARS-CoV-2-nucleïnezuur met behulp van rt-PCR;
(2) Genetische sequentiebepaling van virus uit monsters van luchtwegen, bloed of ontlasting is zeer homoloog met het bekende SARS-CoV-2;
(3) Serum nieuw coronavirus-specifiek IgM-antilichaam en IgG-antilichaam waren positief;
(4)Serum nieuw coronavirus-specifiek IgG-antilichaam veranderd van negatief in positief of coronavirus-specifiek IgG-antilichaam tijdens herstelperiode is 4 keer hoger dan dat tijdens de acute periode.
Diagnose en behandeling van COVID-19
| Richtlijnen | gepubliceerd | Bevestigde diagnostische criteria |
| Versie 7e | 3maart.2020 | ❶ PCR ❷NGS ❸IgM+IgG |
| Versie 6e | 18 feb.2020 | ❶ PCR ❷NGS |
Referentie
1. Richtlijnen voor diagnose en behandeling van nieuwe coronaviruspneumonie (proefversie 7, National Health Commission of the People's Republic of China, uitgegeven op 3 maart 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Alleen realtime RT-PCR-protocol voor onderzoeksgebruik voor identificatie van 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapore claimt eerste gebruik van antilichaamtest om coronavirusinfecties op te sporen
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. SARS-CoV-2 virale belasting in bovenste luchtwegen van geïnfecteerde patiënten 19 februari 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Virale ladingen van SARS-CoV-2 in klinische monsters Lancet Infect Dis 2020 online gepubliceerd op 24 februari 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Ontwikkeling en klinische toepassing van een snelle IgM-IgG gecombineerde antilichaamtest voor SARS-CoV-2
Diagnose infectie XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Posttijd: 17-mrt-2020
